Цитологическое исследование у собак

ОПИСАНИЕ

Цитологическое исследование мазка-отпечатка с кожи является быстрым и диагностически ценным методом исследования. Данный вид исследования часто применяют при экссудативных поражениях и себорее. Выделяют прямой и непрямой методы получения образца. При прямом методе получения мазков-отпечатков предметное стекло плотно прижимается непосредственно к пораженному участку (язве, эрозии, корочкам, пустулам, бляшкам, папулам, узелкам, свищевым ходам). Перед этим поверхность слегка обрабатывается, чтобы в первую очередь выявить репрезентативные клетки. Прямые мазки-отпечатки также могут выполняться с поверхности удаленных поражений для быстрой идентификации в случаях подозрения на опухолевый или воспалительный процесс. При непрямом методе сбора образца используют тампон, кюретку или лезвие скальпеля. Пораженный участок слегка соскабливают смоченным в минеральном масле инструментом, прикладывают к нему предметное стекло и аккуратно «растягивают», не вызывая повреждения клеток. Непрямые мазки-отпечатки чаще используют при мокнущих повреждениях и в с труднодоступных участков кожи (например, с ушей и лап).
Тонкоигольная аспирация является быстрым, дешевым и минимально инвазивным способом исследования нодулярных поражений, кожных опухолей и увеличенных лимфатических узлов. При аспирации в образец попадает незначительное количество клеток, которые могут оказаться непоказательными и не дадут никакой информации о тканевой архитеконике и инвазивности. Поэтому цитологическое исследование кожи является скрининговым методом и не заменяет биопсию и гистологическое исследование.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей и дополнительных сведений.

Препарат исследуют на наличие лейкоцитов, эритроцитов, ядерного эпителия, фагоцитоза, наличия микрофлоры, малассезий и, возможно, присутствие другого материала. В примечаниях указывают наличие других типов клеток (акантолитических, тучных, плазматических клеток, фибробластов), уточняют преобладание популяций лейкоцитов.
При интерпретации результатов цитологического исследования мазков-отпечатков с кожи оценивают состав и соотношение клеточного состава, а также микрофлоры. Обнаружение большого количества различных типов клеток (нейтрофилов, эозинофилов, лимфоидных клеток, моноцитов/макрофагов, эпителиальных клеток и фибробластов) предполагает наличие острого воспаления. Обнаружение значительного количества моноцитов, а также лимфоцитов и плазматических клеток указывает на хроническое течение воспалительного процесса. Наличие небольшого количества лимфоцитов и плазматических клеток часто встречается при любой форме воспалительного процесса в коже, но обнаружение большого их количества может свидетельствовать о неоплазии или лимфоцитарно-плазмоцитарном пододерматите. Реактивные фибробласты и эпителиальные клетки также могут появиться при развитии неопластических процессов. Свободнолежащие бактерии обозначают контаминацию образца, однако фагоцитоз бактерий указывает на патогенность микроорганизма и является признаком инфекционного процесса. Дегенеративные нейтрофилы в мазке (кариорексис и большие, фрагментированные ядра без цитоплазмы) и наличие микрофлоры свидетельствуют о пиодермии, тогда как наличие недегенеративных нейтрофилов с пикнотическими ядрами (темноокрашенными со сгруппированными сегментами) предполагает стерильное воспаление. Обнаружение при этом акантолитических клеток может указывать на развитие аутоиммунного заболевания. Хотя акантолитические клетки также могут встречаться при бактериальных и грибковых инфекциях. Выявление большого количества бактерий и эпителиальных клеток может свидетельствовать о разрастании резистентной микрофлоры и снижении защитных свойств иммунной системы организма. Наличие эозинофилов в мазке подтверждает аллергическую реакцию, фурункулез, комплекс эозинофильной гранулемы у кошек. Эозинофилы и тучные клетки в мазке обнаруживаются при мастоцитоме. Выявление значительного количества малассезий указывает на наличие малассезионного дерматита. Пиогранулематозное воспаление может быть связано с менее распространенными бактериальными и грибковыми инфекциями.
В случае обнаружения клеток с признаками атипии рекомендуется проведение цитологического исследования квалифицированным цитологом.

Единицы измерения: не обнаружены или обнаружены (результат указывается в крестах или в количестве в полях зрения).

Цитологический метод основан на микроскопическом изучении и оценке клеточного материала, полученного различными способами из патологического очага. Материалом могут быть: жидкости (мокрота, моча, сок предстательной железы, выделения из молочных же-лез, соскобы и отпечатки с эрозированных или язвенных поверхностей, и др.), пунктаты, отпечатки с удаленных тканей.

Для чего необходима цитология.

Цель цитологического метода — получить информацию о наличии или отсутствии злокачественного новообразования. Цитологический анализ также позволяет оценить характер и степень выраженности пролиферации эпителия, диагностировать предраковые состояния и дисплазии, выявить очаги неспецифического и специфического воспаления.
Исследование цитологии кожи.

Цитология мазков с кожи – одно из часто используемых в ветеринарной дерматологии исследований, при помощи которого можно определить наличие или отсутствие воспалительного процесса в коже, а также его характер. Цитология мазков с кожи проводится пациентам с любыми кожными проблемами – при зуде, наличии признаков инфекции (абсцессов, папул, пустул и т.д.). Цитология мазков из ушей позволяет уточнить этиологию отита и провести адекватное лечение.

Результаты цитологии кожи являются основополагающими при выборе тактики лечения собак и кошек с кожными заболеваниями. Поэтому цитологию предпочтительно выполнять до начала терапии. Если же лечение уже проводится или цитология используется для оценки эффективности терапии, перед исследованием необходимо сообщить специалисту о применявшихся или применяемых препаратах.

Заключение цитолога основывается на результатах исследования клеточного состава цитограммы с учетом данных клинического обследования. Весь собранный биоматериал исследуется непосредственно в лаборатории ветклиники, что исключает риск его старения и постановки ложного диагноза.

Сдать анализ для цитологического исследования можно непосредственно на приеме у ветеринарного врача.

Записаться на приём

Цитологический анализ крови,выпотных жидкостей и гистологический анализ опухоли у животных является одним из основных методов в ветеринарной диагностике.На первый взгляд техника сбора материала для анализа предельно проста. Тем не менее для правильной диагностики необходимо соблюдение нескольких несложных правил, которые помогут морфологу поставить правильный диагноз.

Для цитологического анализа в ветеринарии обычно используются следующие инструменты:

Чистые одноразовые стекла

Стерильные шприцы

Иглы диаметром 18-22Ø

Скальпели(для соскобов)

Стерильные контейнеры(если объем жидкости превышает 10 мл)

Желательно использование 5% раствора цитрата натрия либо ЕДТА для предотвращения свертывания материала

Методы забора материала для цитологического исследования:

Мазки-отпечатки: для цитологического исследования могут быть приготовлены взятием с наружных покровом у живых животных или тканей взятых в процессе операции или некроскопии. Их легко получить и они требуют минимум навыков, но при таком методе получается меньше клеток чем при соскобе и присутствует большая степень инородных примесей в виде бактерий и прочих клеток, чем при сборе пунктата. Как результат-зачастую мазки-отпечатки отражают лишь вторичную бактериальную инфекцию или дисплазию тканей,вызванную воспалительным процессом.Также важно учесть что при сборе материала с язвенной, воспаленной поверхности брать отпечаток необходимо ДО ОЧИСТКИ поверхности.

Соскобы с ткани: такому методу взятия материала свойственно сбор большого количества клеточного материала, это особенно важно когда в качестве материала выступает твердая ткань, содержащая мало клеток(например костная ткань, либо кальцификат ткани).Соскобы берутся с ткани путем нескольких поступательных движений скальпеля, лезвием перпендикулярно ткани.

Смывы для цитологического исследования в ветеринарной диагностике используются в основном для исследования влагалищных мазков на овуляцию. После взятия материала стерильным урогенитальным зондом необходимо аккуратными плавными движениями повращать по стеклу и отправить в лабораторию. Тереть (тем более яростно) зонд об стекло НЕЛЬЗЯ! Это приведет к массовому разрушению клеток и таким образом гарантирует ложный результат анализа.

Биопсия ткани является «золотым стандартом» в ветеринарной цитологии поскольку позволяет:

-получить клетки необходимого типа

-получить клетки в любом количестве

-устраняет бактериальную загрязненность

-можно получить в том числе и с внутренних органов, под контролем УЗИ.

-устраняет загрязнение материала кровью и другими тканями.

При использовании любого метода следует учесть что клеточный материал должен хранится при температуре +4 — + 7 °С

Наиболее часты ошибки при взятии материала на цитологический анализ:

-Нельзя брать цитологический анализ из некротизированной ткани или ткани с чрезмерным уровнем воспаления,так как это приведет к нерепрезентативной клеточной выборке

-Материал должен быть собран не менее чем на 3х стеклах,желательно собранных с разных мест чтобы получить точную и достоверную клеточную картину процесса

-Наличие избытка периферийной крови приводит к разбавлению клеток и делает материал неинформативным.Причинами появления избытка крови как правило являются использование слишком крупныхигл, либо слишком большое погружение иглы в ткань, либо слишком долгое её там нахождение.

-Критичным является этам нанесения материала на стекло.Материал должен быть нанесен на стекло сразу же после взятия для предотвращения его высыхания и образования клеточного сгустка.Важно избегать образования тостого слоя клеток,поэтому если материала много лучше нанести его на несколько стекол

Выпотные жидкости.Эксудаты и транссудаты.Жидкости серозных полостей.

Материал берется пункционно в чистую,стерильную посуду, по возможности-максимальное количество. Обязательно необходимо собрать и отправить в лабораторию последнию фракцию жидкости,наиболее богатую клетками.

Чтобы материал не свернулся непосредственно после взятия жидкость лучше взять в пробирку с К3ЕДТА(клиническую пробирку), так как антикоагулянт предотвратит образование сгустка клеток.

Если материал удается собрать в большом количестве рекомендуем Вас направить его также на микробиологическое и вирусологическое исследование,чтобы составить более полную картину диагноза.

Мазки-отпечатки: для цитологического исследования могут быть приготовлены взятием с наружных покровом

Мы проводим цитологическое исследование пунктата с органов и ткани,пунктата кожи и молочных желез,проводим исследование экссудатов,транссудатов,секретов.Исследуем мазки отпечатки с эрозий,язв,свищей.Исследуем отпечатки с опухолей и новообразований.Исследуем мокроту,выделения из матки.Исследуем эндоскопический материал.Проводим цитологическое исследование мочи.

Соскобы кожи используются в дерматологии для диагностики паразитарных поражений кожи и дерматофитозов («лишая»).

Заболевания, при которых может быть информативным исследование соскобов кожи:

• отодектоз — поражение ушным клещом, поверхностный соскоб;
• нотоэдроз — кожная чесотка кошек, поверхностный соскоб;
• хейлетиеллез — «блуждающая перхоть», поверхностный соскоб;
• демодекоз — «железница», демодекозная чесотка, глубокий соскоб;
• саркоптоз — зудневая чесотка, поверхностный соскоб;
• дерматофитоз («лишай») — грибковое заболевание кожи, поверхностный соскоб. В соскобе обнаруживаются споры и гифы грибка, но его вид можно определить только путем посева на питательную среду в лаборатории.

Показания для взятия соскобов — это очаговые или обширные безволосые участки, зуд, перхоть, угревая сыпь на коже, повышенная жирность кожи или жирные слепки, межпальцевый фурункулез.

К паразитарным заболеваниям предрасположены молодые животные, хотя они могут встречаться в любом возрасте.

Техника проведения глубокого соскоба кожи

Глубокий соскоб кожи проводится при подозрении на демодекоз. Возбудитель демодекоза паразитирует в сальных железах кожи на границе эпидермиса и дермы. Поэтому при взятии пробы можно осторожно сдавить кожу пальцами, чтобы выдавить из нее клещей. Шерсть лучше предварительно состричь. Площадь взятия соскоба может быть небольшой, важно правильно выбрать место.

На подготовленное стекло наносится несколько капель вазелинового масла или глицерина. Кожу или лезвие скальпеля тоже нужно слегка увлажнить маслом. Соскоб производится лезвием скальпеля перпендикулярно поверхности кожи и переносится на стекло. Критерием правильности взятия глубокого соскоба является появление капелек крови.

Техника проведения поверхностного соскоба кожи

В первую очередь необходимо выбрать место взятия пробы. Соскоб нужно делать в зонах максимальной вероятности обнаружения паразита — участки облысения, воспаленной или покрасневшей кожи, под скоплениями перхоти, в местах расчесов или областях излюбленной локализации предполагаемых паразитов.

Поверхностный соскоб берется с относительно большой площади кожи, длинную шерсть предварительно нужно подстричь, кожу увлажнить маслом. Материал берется поверхностно с большой площади и переносится на стекло. Для удобства просмотра можно закрыть материал сверху другим стеклом.

Взятие поверхностного соскоба у котенка. Данный метод позволяет выявлять клещей хейлетиелла, дерматофиты.

Интерпретация результатов соскоба кожи

При соблюдении всех правил взятия материала большинство паразитов легко обнаруживаются в соскобах кожи или содержимого слухового прохода. В сомнительных случаях при подозрении на демодекоз можно дополнительно использовать выщипы волос.

Отсутствие паразитов в материале при подозрении на отодектоз, хейлетиеллез, демодекоз, нотоэдроз позволяет с высокой достоверностью исключить эти диагнозы из списка подозреваемых.

При подозрении на саркоптоз пробная противопаразитарная терапия проводится даже при отрицательных результатах соскоба, так как клещей можно не обнаружить из-за их малого количества.

При дерматофитозе соскоб является вспомогательным методом диагностики.